El ADN mitocondrial (ADNmt) se hereda
exclusivamente por vía materna y puede influenciar caracteres asociados a la
productividad por ser una fuente de variación genética.
El objetivo de este trabajo fue realizar un
análisis molecular a fin de corroborar la ausencia de polimorfismos dentro de
los linajes, la correcta formación de los mismos, y para determinar si las
diferencias productivas se asocian con polimorfismos entre linajes.
Materiales y métodos
La productividad fue definida como la cantidad de
kg de carne totales producidos por una vaca a lo largo de su vida útil. Se
determinaron linajes maternos en los vientres de raza Hereford de la Unidad de
Investigación Nº 7 del INTA de Balcarce, en forma retrospectiva de cada
vientre por la vía materna. Se consideró vaca fundadora de un linaje a la
última antecesora disponible con información, asignándole ese mismo linaje a
todos sus descendientes. El número total de linajes encontrados fue 73.
Para los análisis estadísticos se aplicó un Modelo
Animal mediante MTDFREML, estimando los componentes de varianza aditivos
directos y maternos y el componente citoplasmático. Como resultado de ellos,
se encontró que el efecto citoplasmático resultó poco importante. Estos
análisis cuantitativos se realizaron bajo el supuesto de que existe
homogeneidad del ADNmt dentro de las líneas citoplasmáticas, esperando que
existan polimorfismos entre las mismas.
El análisis molecular se realizó a fin de poder
identificar los posibles polimorfismos en el ADNmt entre y dentro de líneas
citoplasmáticas en 35 individuos provenientes de cinco linajes: dos altamente
productivos, uno de productividad intermedia y dos de baja productividad. Se
estudió una región de alta variabilidad perteneciente al D-loopmitocondrial, a
través de la técnica de PCR.
Posteriormente se comparó la región amplificada
con un fragmento testigo utilizado previamente, el cual se halla comprendido
entre las bases 15.960 y 16.334 de la región del D-loop.
Resultados
El fragmento que se utilizó como control (A) es el
fragmento comprendido entre las bases 15.960 a 16.334 de la región D-loop del
bovino. Los restantes fragmentos que se ubican a la izquierda del control en
la pertenecen a animales que fueron tomados al azar de las amplificaciones
realizadas en el presente estudio. Como se puede observar hay coincidencia en
el tamaño de los fragmentos, por lo que la región amplificada fue la correcta.
Los resultados de los análisis de los
polimorfismos conformacionales de cadena simple (SSCP) de los 35 animales
evaluados, revelaron 4 haplotipos diferentes los cuales pueden observarse en
la Figura 2. Se detectaron 2 linajes con el mismo patrón de bandas, y el resto
de los linajes mostraron un patrón característico cada uno.
Los linajes 2412, 2437 y 2440 provinieron de la
Reserva Nº8 de la EEA Balcarce, mientras que los linajes 40 y 650 provienen de
dos establecimientos comerciales de la zona. Todos los animales evaluados que
compartieron un mismo linaje citoplasmático tuvieron el mismo haplotipo, salvo
un animal perteneciente al linaje 40 que presentó características del
haplotipo número 3. En base al polimorfismo encontrado en el linaje número 40,
se graficó la genealogía de los animales, Figura 3. No se evaluó ningún
descendiente del animal que presentó el haplotipo 3.
ConclusionesEl análisis de
haplotiposmitocondriales mediante SSCP reveló las dos fuentes posibles de
error en las que podría incurrirse al agrupar las hembras en base a registros
de pedigree. En primer lugar la detección de linajes con un haplotipo común,
lo que indica que las hembras consideradas fundadoras de dichos linajes, en
realidad podrían pertenecer a un mismo linaje en común.
En segundo lugar, se evidenció la falta de
uniformidad con respecto a los haplotiposmitocondriales dentro de un mismo
linaje materno. El hallazgo de diferentes haplotipos podría ser debido a un
supuesto caso de heteroplasmia, o sería producido muy probablemente por
Un error en los registros o a una identificación
equivocada. Este polimorfismo dentro del linaje causaría un aumento en la
variancia intra linaje y un incremento del error en los análisis
cuantitativos, disminuyendo por consiguiente la posibilidad de detectar
efectos significativos.
Presentado en el XXIV
Congreso de Producción Animal / oct. 2002. López Valiente, S., Corva, P.,
Mezzadra, C., Melucci, L., y Villarreal, E. Unidad Integrada Balcarce EEA INTA
Fac. Cs. Agrarias, UNMdP
Fuente: INTA Balcarce
