 0114.
Obtención de muestras para el diagnóstico de parasitosis gastrointestinal de
bovinos y ovinos.
Carlos
Entrocasso
centrocasso@balcarce.inta.gov.ar
Grupo
de Sanidad Animal
Estación
Experimental Agropecuaria Balcarce
Estimación
e interpretación del HPG (número de huevos por gramo de materia fecal).
Anamnesis
y consideraciones generales
En
general no hay una relación directa entre el HPG y el Nº de parásitos
existentes en el tracto gastrointestinal.
Edad
En
el bovino después de los 9 –11meses de edad es muy relativo el dato de HPG,
sobre todo si es bajo porque indica que la inmunidad puede estar actuando en
forma importante, pero si el HPG es alto se interpreta el conteo y su
importancia como tal.
Estado
general
Es
conveniente recorrer los potreros para observar el o los lotes de animales
problemas, de esta manera se tiene una mejor visión del conjunto y se puede
considerar comparativamente al lote en su conjunto.
Es
de interés especial considerar:
-
Antecedentes
de la alimentación, cómo fue durante el año y sobre todo los 2 a 3 meses
antes hasta la fecha, en cuanto a calidad y cantidad del alimento.
-
Antecedentes
de enfermedades tanto infecciosas, carenciales o parasitarias.
Manejo
del rodeo
Epoca
de parición, de destete, fecha de vacunación y de desparasitación.
Es
muy importante conocer la marca del producto aplicado la última vez (según el
tipo de droga cambia la persistencia del efecto), a qué tipo de potrero se los
envió luego del tratamiento (por ej. los potreros bajos son más peligrosos que
los altos).
Condiciones
climáticas que pudieran haber producido alteración
en la supervivencia de las larvas en la pastura.
Recordar
que la humedad favorece la supervivencia de las mismas y son factores adversos
el sol intenso y la sequedad.
Tipo
de pasturas
Aquellas
en las que abundan el trébol y otras leguminosas mantienen mejor la humedad del
suelo y favorecen por lo tanto la sobrevivencia y evolución de las larvas. Si
su número es muy alto será un peligro constante para la reinfección de los
animales.
El
historial de problemas previos por potrero es un dato valioso.
A
estos aspectos debemos considerarlos en su conjunto ya que todos se
interrelacionan y ayudan a realizar un diagnóstico y pronóstico.
Extracción
de muestras
1.
Número de animales: debe ser representativo del
lote afectado, tener en cuenta que todos esos animales estén en un mismo
potrero, porque si pertenecen a potreros distintos se debe tomar de los dos
lotes muestras independientes.
En
general se considera adecuado un número de 12 a 15 muestras por lote.
La
capacidad de análisis del laboratorio es una limitante que debe tenerse en
cuenta al organizar un muestreo en un establecimiento.
2.
Las muestras deben ser individuales, no realizar un
pool mezclando materia fecal de varios animales.
Los
análisis individuales permiten apreciar si hay animales con HPG alto con
respecto a otros (se puede deber al principio de una infección) y más si
existen condiciones concomitantes, anteriormente citadas.
El
pool haría que esos datos se diluyeran en el resto.
3.
Tener cuidado con elegir sólo animales con
diarrea, este signo importante es un indicador del final de la enfermedad; los
animales diarreicos quizás no representen -por su bajo conteo de HPG- la
realidad.
Si
se mandan apartar animales a caballo, tener en cuenta que los enfermos, correrán
menos llegando sólo los mejores.
4.
Se deben sacar las muestras directamente del recto
estimulando el reflejo anal introduciendo los dedos. Esto permite tomar
información adicional, como consistencia, color, presencia de mucosidad, etc.
Es
práctico llenar la manga con animales e ir sacando las muestras sin soltarlos
porque así se inmovilizan entre ellos.
5.
La cantidad de materia fecal debe ser entre 80-100
gramos por animal.
La
cantidad de huevos no está distribuida homogéneamente en la materia fecal, de
esta manera luego de obtenida la muestra en el laboratorio se homogeiniza y se
toma la cantidad necesaria para el método.
Este
punto es sumamente importante y ocasiona grandes errores si no se toma esos
recaudos.
Información
complementaria útil
La
necropsia a campo y el procesamiento en el laboratorio de las muestras de
animales parasitados brindará información precisa no sólo del tipo y número
de parásitos presentes sino también del estado de desarrollo de la población
parasitaria.
Cuando
se tiene oportunidad de sacrificar un animal o realizar la necropsia de uno recién
muerto, es conveniente medir el pH del contenido abomasal con la finalidad de
estimar la funcionalidad de dicho órgano (pH normal = 1,5 - 2; animales muy
parasitados pH 4-6).
La
necropsia puede revelar alteraciones morfológicas asociadas a la parasitosis
como por ejemplo: edemas en tejido subcutáneo, ascitis, linfonódulos mesentéricos
hipertrofiados y edematosos, gastritis con edema de pliegues, enteritis
catarral, etc.
Necropsia
y toma de muestras para recuento de parásitos adultos
Una
vez abierta la cavidad abdominal se procede a ligar el cuajo a la altura del píloro,
y se lo separa del resto del aparato digestivo junto al librillo para evitar
derrames de contenido. El otro corte se hace inmediatamente detrás de la
ligadura en el píloro.
El
intestino delgado es separado del mesenterio con cuchillo filoso hasta llegar a
la válvula ileocecal.
El
intestino grueso se separa de la misma manera, descartándose la última parte
del recto.
Equipamiento
necesario
2
Baldes de 12-15 lts. (A) y 5-7 lts. (B)
2
Cucharones de 100 cc. (C) y 25 cc. (D)
1
Recipiente de vidrio de 750 cc. de capacidad, boca ancha y tapa metálica
roscada
1
Abridor de intestino (tijera punta roma)
Bandejas
Placas
de Petri
Solución
yodo-iodurada; hiposulfito de sodio.
Preparación
del equipo
El
balde B es marcado en su lateral con divisiones en múltiplos de 10 (10, 20, 30,
...) equivalentes al volúmen del cucharón C.
El
recipiente de vidrio de 750 cc. es marcado en su lateral con divisiones en múltiplos
de 5 (5, 10, 15, ...) equivalentes al volúmen del cucharón D. A la tapa metálica
se le corta en círculo la parte superior para colocarle una malla de 60 meshes
la cual quedará fija a través de una arandela plana de goma, cuando la tapa se
enrosque en el frasco.
Procedimiento
de laboratorio
Una
vez obtenido el cuajo y el intestino delgado, se separa una de otra evitando se
pierda el contenido.
Al
cuajo se lo abre por una de sus curvaturas y el contenido es volcado en el balde
A. Se lava cuidadosamente por pliegue agregando el lavado al contenido ya
guardado.
El
contenido del balde A es pasado al balde B y se agrega agua hasta nivelar en una
de las marcas laterales.
Homogeneizar
el contenido con el cucharón C y extraer varias alícuotas hasta completar el
10 % del total del lavado.
La
submuestra del 10% se pasa al recipiente de vidrio marcado el cual se cierra y
se agita vigorosamente para disminuir el contenido. Se agrega agua y se repite
la operación hasta que el contenido quede límpido.
Agregar
agua hasta nivelar el contenido en una de las marcas laterales. Se homegeiniza
con el cucharón D y se extrae una alícuota equivalente al 10% como en el punto
3.
La
alícuota se pone en una placa de Petri con el agregado de unas gotas de tintura
de yodo. Se deja reposar 3 minutos y se decolora con hiposulfito de sodio. En un
fondo claro se observarán los nematodes teñidos marrón oscuro. Para facilitar
la tarea se efectuará la lectura sobre una superficie iluminada.
Se
extraerán los parásitos con aguja histológica o símil y se los pasa a una
placa de Petri con agua para su recuento e identificación.
Factor
de multiplicación: Según las diluciones seguidas en el ejemplo cada parásito
obtenido debe ser multiplicado por 100. Esto surge porque las dos alícuotas con
las que se trabajó fueron del 10% cada una. Por lo tanto multiplicado los dos
porcentajes arrojan el factor de multiplicación.
Guía
de recuento de adultos en bovinos (varía con la edad).
(Skerman
y Hillard, 1966)
Guía
de recuento de adultos en ovinos
Fuente:
Circulo
de Médicos Veterinarios del Sur de Santa Fe
http://www.veterinariosursf.com.ar | 
