019. Comparación del Efecto Terapeútico del Albendazol,  Ivermectina y Nitazoxanida en Infección por Trichinella Spiralis  con Diferente Carga Parasitaria en Fase Intestinal en Modelo Experimental Murino.

M. I. Chávez Ruvalcaba MVZ**.;

J. J. Muñoz Escobedo M en C*.;

M. R. Morales Vallarta Dr. en C**.;

M. A. Moreno García Dra. en C*.;

*Unidad Académica de Biología Experimental, Universidad Autónoma de Zacatecas, Apartado Postal 12, Guadalupe, Zacatecas, México. **Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, Ciudad Universitaria, a. P. F-16 66450 San Nicolas de los Garza Nuevo León, México.

RESUMEN

La Trichinellosis es una enfermedad parasitaria de distribución mundial, y es transmitida al hombre por el consumo de carne deficientemente cocida, para la cual no existe tratamiento definitivo. Fue estudiada la eficacia del Albendazol (ABZ),  la Ivermectina (IVM) y la Nitazoxanida (NZX) contra la infeccion causada por Trichinella spiralis en 40 Ratas Wistar. Todos los animales fueron  agrupados, pesados y sangrados previamente a la infección. Cada animal se infecto con las larvas infectantes (LI) de Trichinella spiralis: Se formaron 8 grupos de 5 animales cada uno. Tal como se indica a continuación: El grupo No. 1. Infectadas con 1000 LI, como grupo control. Grupo No.2.  Infectadas 500 LI como grupo control. Grupo No.3. Infectadas con 1000 LI  con tratamiento de ABZ.  Grupo No.4. Infectadas con 500 LI con tratamiento de ABZ. Grupo No.5. Infectadas con 1000 LI tratadas con IVM. Grupo  No.6. Infectadas con 500 LI tratadas con IVM.  Grupo No.7. Infectadas con 1000 LI tratadas con NZX y grupo No.8. Infectadas con 500 LI tratadas con NZX. El tratamiento con los fármacos se realizo a partir del día 7 pos- infección.

En base a los resultados se observó  que los animales infectados con 1000 LI  y tratados con ABZ presentaron un 47% de efectividad, los tratados con IVM un 73% de efectividad y los tratados con NZX un 0% de efectividad en relación a los del grupo control. Así mismo los infectados con 500 LI y tratados con ABZ presentaron un 95.29% de efectividad, los tratados con IVM un 76% de efectividad  y los tratados con NZX un 19.28% de efectividad en relación a los del grupo control. De los resultados obtenidos se concluye que el medicamento que presentó mayor eficacia  ante la infección con 500 LI en ratas, fue el Albendazol y en la Infección con 1000 LI fue la Ivermectina y el medicamento que en ambos casos presentó nula o escasa actividad fue la Nitazoxanida

PALABRAS CLAVE: Albendazol, Ivermectina, Nitazoxanida, Tratamiento, Trichinellosis.

INTRODUCCIÓN

La Trichinellosis es una enfermedad parasitaria zoonótica que afecta a mamíferos silvestres y domésticos,  en nuestro país (México), se trasmite de modo accidental al hombre  al consumir carne contaminada de cerdo. Las manifestaciones clínicas son  variables, dependiendo de la sensibilidad del individuo, y de la cantidad de larvas ingeridas.

Debido a la dificultad y baja incidencia de detección de la enfermedad, el  ineficiente control sanitario en la canal del cerdo contaminado y la práctica frecuente de matanza clandestina en animales de traspatio, hace necesaria la búsqueda de fármacos que actúen de manera adecuada en las primeras etapas de la infección, para así disminuir o erradicar la probabilidad de que se continué reproduciendo el ciclo vital del parásito

Algunos fármacos antihelmínticos  actúan  en formas adultas de nemátodos a nivel gastrointestinal, Rossignol (1983) muestra en estudios realizados en Europa, Este de África y Asia, que el ABZ a dosis única de 400 mg presenta un amplio espectro antihelmíntico en el control de infecciones graves causadas por nemátodos. Marinculic et al en el 2001, menciona que el tratamiento con Flubendazol (FBZ) en su ensayo en  parásitos adultos en cerdos, fue 100% efectivo,  con dosis de 8 mg/kg y 16 mg/kg por 6 y 14 días después de la infección por T. spiralis.  Chung  (2001) afirma que el  FBZ es más efectivo que el Albendazol (ABZ)  en la fase adulta de T. spiralis  en el ratón a dosis de 20mg/kg /día/5dias con una efectividad de ABZ 46% Y FBZ 99.4%. Por otra parte, Sebastiao (2001) muestra la eficacia de la Ivermectina (IVM) presentando varios estudios realizados por otros autores  con un  93% de efectividad en escabiosis, 73% en pediculosis, 96% en oncocercosis con tratamiento de 2 meses, y observa resultados del tratamiento en estrongiloidosis con un 96% de reducción parasitaria en comparación con el tratamiento de ABZ que presenta un 45% de efectividad. Sobre la Nitazoxanida (NZX) se han elaborado varias investigaciones donde se menciona le efectividad de este fármaco, Eguiza S, 2000 menciona una eficacia global tanto contra helmintos como protozoarios y aun en formas múltiples o  mixtas con un 85 y 97% y justifica su uso por el alto nivel de eficacia, gran margen de seguridad, amplio espectro, tolerabilidad y aceptación, facilidad de manejo y bajo costo.

Antecedentes sobre los fármacos antiparasitarios utilizados: El albendazol es un carbamato del benzimidazol, es un antihelmíntico de amplio espectro, utilizado a nivel mundial para la erradicación de las parasitosis (Goodman et al, 2002), Los benzimidazoles ocasionan muchos cambios  bioqímicos en nemátodos sensibles,  hay pruebas de peso que demuestran que la acción primaria entraña la inhibición de la  polimerización de microtúbulos  al unirse a la β-tubulina (Lacey et al, 1988, 1990,; Prichard et al,  1998), este bloquea la captación de glucosa de los parásitos susceptibles  en la etapa larvaria y adulta, abatiendo sus reservas de glucógeno y disminuyendo la formación de trifosfato de adenosina (ATP). Como resultado el parásito se inmoviliza  y muere (Katzung, 2002). Su administración es por vía oral a dosis aproximada de 400 mg en dosis única en personas desde los 2 años de edad hasta edad adulta, dependiendo del parásito será la repetición de la dosis. Es metabolizado rápidamente en el hígado, hasta la forma de sulfóxido de albendazol (es el que mantiene la actividad antihelmíntica) se liga aproximadamente en una proporción de 70% a proteínas plasmáticas, su vida media en el plasma es de 8 a 9 horas  (Goodman et al 2002). A diferencia de los otros benzimidazoles,  tiene pocos efectos adversos si se utiliza por poco tiempo, está contraindicado debido a que es teratógeno y hembriotóxico por tanto no se recomienda a personas embarazadas, ni a niños menores de 2 años.

Ivermectina es una lactóna macrocítica semisintética, y se deriva  del actinomiceto del suelo  Streptomyces avermitilis inmoviliza a  los organismos afectados al inducir parálisis tónica de sus músculos (Katzung, 2002), la parálisis es mediada por la potenciación y activación directa de los canales de Cl- sensibles a ivermectina, controlados por el glutamato. Esos canales están solamente presentes en nervios y células musculares de los invertebrados y una vez potencializados ocasionan un aumento de permeabilidad en la membrana a los iones de cloro, con hiperpolarización de los nervios y las células musculares, resultando la parálisis y muerte del parásito, como lo demostraban Arena et al 1995.  y Cully et al 1994. Los canales de Cl- controlados por el glutamato probablemente sirven como dos lugares de acción de la ivermectina también en insectos y crustáceos,  es metabolizada ampliamente, la dosis recomendada es de 200 mg/kg en dosis única y presenta  una vida media  de 27 horas, se une el 93% a proteínas plasmáticas,  se refiere una depuración sistémica lenta (cerca de 1.2 litros/por hora) en un volumen aparente de distribución de aproximadamente 47 litros. Se excreta poco por el riñón  y su mayor excreción es por heces, pasa a la leche materna carece de efectos farmacológicos o tóxicos conocidos en el ser humano; ello se debe en parte al echo de que la ivermectina no cruza la barrera hematoencefalica. Se recomienda para el control colectivo y terapéutica de diversos parásitos como cestodos, trematodos, helmintos y protozoarios ( Sebastiáo, 2001, The Merk I, 1996). Debe ser administrada con cautela en pacientes que usan drogas que deprimen el Sistema Nervioso Central (Sebastiáo. 2001).

Rossignol (Investigador americano de origen francés) realizó una modificación en el anillo de los metronidazoles, y básicamente ello originó la molécula de la Nitazoxanida, el cambio se realizó en la estructura básica al sustituir el nitrogeno por el azufre (Eguiza, 1998). Este fármaco fue autorizado para su salida al mercado nacional por la Dirección General de Insumos para la Salud, dependiente de la Secretaria de Salud en 1996.

Nitazoxanida presenta un solo metabolito, su vida media es corta de una hora, se puede administrar cada 12 horas, se elimina por las heces y su mecanismo de acción es el siguente:

1º Bloquea el ciclo aerobio de la glucosa, de tal manera que los productos del metabolismo de la glucosa no terminan en agua y CO2, sino que termina por medios anaerobios, por lo que el resultado es ácido láctico crea un ambiente hostil para los microorganismos, que prácticamente los destruye.

2º En Protozoarios la reducción  que se hace al sustituir el nitrógeno por el azufre permite que la nitazoxanida, básicamente su metabolito, penetre en el DNA del parásito, lo que hace que se rompa, que se fragmente la estructura del material nucleico y con ello se inhiba la síntesis del ácido nucleico. Tiene utilidad contra nematodos, céstodos  y tremátodos (Eguiza, 1998).

Como efectos adversos presenta nauseas, vomitos, dolor abdominal, diarrea y se recomienda 7.5mg/kg/dosis, es decir, la dosis diaria es de 15 mg/kg, dividida dos veces al día. La administración habitual es de tres días (Eguiza, 2000).

MATERIAL Y METODO

Se utilizaron 40  Ratas Hembras de la cepa Wistar con un peso de 250 gr ±10 gr  de 2 meses de edad, divididos en 8 grupos de 5 animales cada uno, todas fueron sangradas para tomar muestras control,  se procedio a administrar  Larvas Infectantes de Trichinella spiralis; los grupos 1, 3, 5 y 7  fueron infectadas con 1000 LI, y los grupos 2, 4, 6, y 8 con 500 LI. De las ratas  previstas se excluyeron algunas del estudio por causas que estuvieron fuera de nuestro control, como embarazos y muertes por hipersensibilidad o sobredosis al anestesico antes de infectarlos (en el grupo 2 y 6 para infección con 500 LI), como se muestra en el cuadro No. 1. Se formaron 8 grupos de 5 animales cada uno: El grupo No.1. Infectadas con 1000 LI como grupo control. Grupo No.2.  Infectadas 500 LI como grupo control. El Grupo No.3. Infectadas con 1000 LI  con tratamiento de ABZ. Grupo No.4. Infectadas con 500 LI con tratamiento de ABZ. Grupo No.5. Infectadas con 1000 LI tratadas con IVM. Grupo No.6. Infectadas con 500 LI tratadas con IVM. Grupo No. 7. Infectadas con 1000 LI tratadas con NZX y Grupo No.8. Infectadas con 500 LI tratadas con NZX.

La administración oral del Albendazol (Sector Salud) fué de 15mg/kg de peso/al día por tres días consecutivos, la administración de Ivermectina (Iverful ® Aranda) fue de 200 mg/kg dosis única y la de Nitazoxanida (Daxon ® Columbia) 7.5 mg /kg/c/12 hrs. Por 3 días. Apartir del dia 7 pos- infección. Se llevo acabo un  seguimiento de la respuesta inmune sangrándolos 4 ocasiones (preinfección, pos-infección, postratamiento, pre-sacrificio), se obtuvo suero para determinación inmunológica por las técnicas  de Inmunodifusiòn doble e Inmunoelectrotransferencia, los animales se sacrificaron a los 60 días pos-infección  se les realizaron  las  técnicas directas de compresión, digestión artificial y tinción de Hematoxilina-eosina (H/E).

SANGRADO DE LOS ANIMALES

Los animales fueron sangrados antes de infectarlos, posterior a la infección, después de la aplicación del tratamiento con fármacos y antes del sacrificio,  previamente fueron anestesiados con vapores de halotano y se obtuvieron muestras de sangre y se separo el suero para la realización de Inmunodifusiòn doble e Inmunoelectrotransferencia.

INFECCIÓN, TRATAMIENTO Y SACRIFICIO DE LOS ANIMALES

Los animales fueron puestos a dieta sólida 24 hrs antes de la infección. Se formaron 8 grupos de 5 animales cada uno, se les administro el paquete de carne  infectada con 500 LI y 1000 LI individualmente, el grupo No. 1. Infectadas con 1000 Larvas infectantes (LI) como grupo control. Grupo No. 2.   Infectadas 500 LI como grupo control. Grupo No. 3. Infectadas con 1000 LI  con tratamiento de ABZ. Grupo No. 4. Infectadas con 500 LI con tratamiento de ABZ. Grupo No. 5. Infectadas con 1000 LI tratadas con IVM. Grupo No. 6. Infectadas con 500 LI tratadas con IVM. Grupo No. 7. Infectadas con 1000 LI tratadas con NZX y Grupo No. 8. Infectadas con 500 LI tratadas con NZX.

La administración oral del Albendazol (Sector Salud) fué de 15mg/kg de peso/al día por tres días consecutivos, la administración de Ivermectina (Iverful ® Aranda) fue de 200 mg/kg dosis única y la de Nitazoxanida (Daxon ® Columbia) 7.5 mg /kg/c/12 hrs. Por 3 días. A partir del día 7 pos- infección. Para el sacrificio de los animales se introdujeron en una cámara de halotan, a la muerte se despielaron, evisceraron y se realizaron cortes de músculos para técnica de compresión, fijación de formol y técnica de digestión artificial.

TÉCNICA DE COMPRESIÓN EN PLACA.

Para la técnica de compresión en placa se utilizo  aproximadamente 50mg  de cada tejido (masetero, lengua, intercostales, diafragma, pierna, cerebro y cola) cada muestra  se colocó entre 2 laminillas y se comprimieron, ocupando una área de 1 X 5 mm, se observó al microscopio óptico, con el lente 10X, y se realizó el conteo de 10 campos, por triplicado (Del Río et al. 1986 y Fragoso, 1981).

TÉCNICA DE DIGESTIÓN ARTIFICIAL.

Se utilizaron muestras de 30 g de tejido (masetero, lengua, intercostales,  diafragma, pierna) y se incubaron a  37°C, en un tamiz de tul en forma de saco,  suspendido en una solución al 0.3 % de pepsina (10,000 U) y  HCl al 37  % (0.2M) en 500 ml de agua destilada, dentro de un embudo de separación; trascurridas 24 horas se procedió a separar el paquete larvario con las LI, que se depositaron en el fondo del embudo, se observaron en una cámara de newbawer al microscopio óptico con lente 10X (Del Río et al. 1986) cuantificando el paquete.

OBTENCIÓN DEL ANTÍGENO SOLUBLE TOTAL DE Trichinella spiralis..

Para la obtención del antígeno se sacrificaron 4 ratas  de las cuales se incubó a 37º C por 24 horas según el método descrito por Del Río y col en 1986, en donde se colocó (aproximadamente) 60gr de tejido  en un tamiz de tul, en forma de saco; en suspensión  de una solución al 0.03 % de pepsina (10,000 U) y  HCl al 37  % (0.2M) en un litro de agua destilada en un embudo de separación; después de 24 horas se procedió a separar las LI que se depositaron en el fondo del embudo, las cuales, después de varios lavados con solución básica de fosfatos (PBS), se desengrasaron con acetona absoluta  a evaporación y se mantuvieron en PBS, luego se sonicò con la finalidad de romper cutícula y  vaciar  el contenido antigénico de las LI, se centrifugó a 3500 rpm por 1.5 horas, el sobre-nadante es el antígeno soluble total (AST)  mismo que se usó como antígeno para las diferentes pruebas en el modelo experimental con  los sueros problema.

Para determinar que el antígeno tuviera la concentración de proteínas adecuada se obtuvo  una curva estándar usando Albúmina  Sérica  Bovina, según la metodología de Bradford  H. y col. 1986, ajustando la concentración de proteínas obtenidas  a una densidad óptica de 610 nm mediante azul de Coomassie al 0 .06 % preparado en HCl al 2.2 %. Se interpolo el valor de la densidad óptica del antígeno,  a la de la curva estándar de albúmina, se obtuvo la concentración de proteínas contenidas en los dos tipos de antígeno.

Se realizo determinación de proteínas por el método de Bradford H et al 1986, Para fijación del antígeno se realizo el corrimiento electroforético en genes de poliacrilamida (Laemmil 1970). El corrimiento se realizó en una cámara de Protean II xi Cell (Bio- Rad), por espacio de dos horas, usando 100 miliamperes por gel. Se continuó con la tinción de uno de los  geles con el colorante azul de Coomassie G- 250 y su secado en  membranas de celofán.

Se usaron los siguientes marcadores de pesos moleculares: Fosforilasa (97 kDa), Albúmina  sérica bovina (68 kDa), Ovo albúmina (43 kDa), Anhidrasa carbónica (24 kDa) y Lisosima (14 kDa); el gel restante se usó para trasferencia a papel de nitrocelulosa (NC). Así mismo se realizó la técnica de inmunodifusión doble referida por Ouchterlony en 1958 y la técnica de inmunoelectrotransferencia (IET) de acuerdo a lo descrito por (Towbin et al 1979), se realizo la técnica de Hematoxilina-Eosina, el tejido se conserva en formol al 10% para  cortes histológicos, con el fin de determinar las características de la célula nodriza y tejidos circundantes (Manual of Histology 1957).

Como ya mencionamos se realizaron  5 técnicas para la obtención de resultados, 3 directas (Conteo de larvas enquistadas en músculo en 10 campos en tres cortes, Técnica de fecundación y Digestión artificial (Foto 3) y 2 indirectas para detectar respuesta antigénica a los componentes del parásito (Inmunoelectrotransferencia y  Microinmunodifusion doble) Cuadro No. 2.

Para el análisis estadístico se estableció un experimento bajo un diseño de tratamientos factorial y un diseño completamente al azar, los factores bajo estudio fueron A: Técnica que tuvo 2 niveles: 1).- conteo de larvas en cortes de músculo y 2).- conteo de larvas en digestión artificial y el factor B: infección con 8 niveles a).- control con 1000 LI, b).-control con 500 LI, c).-ABZ con 1000 LI, d).-ABZ con 500 LI, e).-IVM con 1000 LI, f).-IVM con 500 LI, g).-NZX con 1000 LI, y h).-NZX con 500 LI,  resultando 14 tratamientos a ensayar. El modelo lineal asociado al diseño de tratamientos expuesto fue de la siguiente forma:  Yijk = M+Ai+Bj+AiBj+Sijk

RESULTADOS

Las larvas obtenidas en este trabajo para la infección de los animales fueron viables por sus características fenotípicas  obteniendo 90 LI en 0.008gr de carne para la realización de los paquetes infectantes.

El cuadro clínico de los animales infectados por  T.  spiralis  se manifestó con diarrea característica de la respuesta celular a la infección, a partir del 3er día de la infección, pelo hirsuto, disminución de la movilidad, ligero encorvamiento y signos y síntomas descritos por otros autores (Rida et al  1981; Cabral et al. 1988; Arnol et al 2001) como mialgia, fiebre, debilidad, edema facial, dolor de cabeza, fatiga, artralgia, calosfríos, astenia, adinamia, dolor en abdomen y coyunturas, pérdida de peso etc..,  en animales que recibieron tratamiento cedió la diarrea y algunos de los signos al segundo día de iniciado este.  Al sacrificio de los animales observamos el complejo célula nodrizas- parásito formadas tanto en animales infectados como en los tratados aunque en menor número.

En el suero de las ratas infectadas por medio de la inmunodifusion doble encontramos la presencia de la banda que nos indica la reacción Ag-Ac, la verificación de la infección la realizamos por medio de la electroforesis.

La electroforesis nos reveló la presencia de una serie de bandas, que están comprendidas en un rango de 97 a 24 kDa, donde se pudo observar la presencia del triplete inmunodominante característico de T. spiralis que oscila entre 42, 45 (Moreno et al. 1996,2001) y 48 kDa  siendo el más marcado el de 43  kDa.

La concentración proteica, y el patrón antigénico, fue similar tanto en el  antígeno extraído por sonicación, como el obtenido por nitrógeno líquido.

El antígeno soluble total tubo una concentración proteica de 2.7mg/ml. Como ya se mencionó los animales infectados con 1000 LI tratados con ABZ presentaron un 47% de efectividad, los tratados com IVM un 73% de efectividad y los tratados con NZX un 0% de efectividad en relación a los del grupo control. Asi mismo los infectados con 500 LI y tratados con Abz presentaron un 95.29% de efectividad, los tratados con IVM un 76% de efectividad  y los tratados con NZX un 19.28% de efectividad en relación a los del grupo control.

A la técnica de H/E el patrón característico del implante de T. spiralis en músculo estriado (foto No. 4.)

En las 4 graficas mostramos los resultados de análisis de varianza realizado a los resultados que se presentan en el cuadro No. 2. Del mismo modo  se observa que la interacción entre factores resultó significativa como se observa en la curva superior de la grafica  No. 2. Sin embargo se observa también que el tratamiento  control alcanzó en la técnica de digestión la expresión mas alta en él número de larvas, con relación a la técnica 1 (compresión) en la cual no se observan diferencias entre medicamentos (grafica No.1.), los ocho puntos expresan cantidades de larvas sin cambios significativos como se muestra en la línea inferior de la misma grafica. En la grafica No. 3 se observan las larvas en Digestión artificial, llama la atención como resalta  el  tratamiento 4  (infectados con 500 LI y tratados con ABZ) es el que presenta menor número de larvas infectantes, seguido por el tratamiento  6 (infectados con 1000 LI y tratados con IVM). En la grafica No. 4.Se observa que los tratamientos 3, 4, y 5 muestran un menor y por tanto mejor intervalo de confianza. En la actividad del tratamiento existe una diferencia estadísticamente significativa se muestra por el análisis de ANOVA con un P value de <0.001.

DISCUSIÓN

La trichinellosis es una zoonosis no controlada en su totalidad, por lo tanto es de vital importancia el estudio de tratamientos adecuados en las diferentes etapas de la enfermedad, actualmente existen muy pocos fármacos eficaces en el tratamiento en su etapa digestiva (Casali, 1977; Yépez, 1991), el aumento en la incidencia ha preocupado a clínicos e investigadores lo que los ha llevado a la búsqueda de tratamientos específicos ( Casalí, 1977; Fragoso, 1983; Yépez,  1999; Eguiza, 2000; Marinculic, 2001 y Chung, 2001).

La magnitud del problema es de gran importancia ya que en múltiples ocasiones pasa desapercibida, principalmente en etapas digestivas, cuando es confundida con una infección gastrointestinal  de tipo bacteriano (Arnol, 2001).

Las ratas utilizadas en nuestro estudio presentaron signos característicos atribuibles a la enfermedad como son pelo hirsuto, dificultad y disminución de la movilidad, diarrea que puede ser característica de la respuesta celular a la infección, posiblemente controlada por la respuesta inmune en el huésped como lo describe Krco en 1983. Los resultados concuerdan con otros autores (Rossignol, 1983) las ratas infectadas con 500 LI y tratadas con ABZ presentaron una disminución en LI de 95.3%,  las tratadas con IVM un 77% y las tratadas con NZX un 20% respectivamente en relación al grupo control. Los resultados con ABZ parecen más efectivos probablemente se deba  a que la carga parasitaria que estamos utilizando es mas  baja por tanto el fármaco alcanza mas sitios receptores en el parásito adulto, afectándolo  y de cierto modo  ayuda la respuesta inmune del individuo.

La IVM es otro antiparasitario que ha venido a revolucionar la terapéutica de las parasitosis debido a su fácil administración, , amplio espectro, su bajo costo, tolerancia y baja toxicidad a dosis única de 200 mg/kg de peso corporal  recomendado por la Code of  Federal Regulations en 1996 (CFR). En nuestro estudio resultó ser más uniforme o equivalente el resultado ya que con ambas cargas (500 LI y 1000 LI) presentó actividad similar en promedio de 75 ± 2%. Es necesario complementar el estudio para demostrar la potencialización o sinergismo del tratamiento con ABZ+IVM.

No así el resultado del tratamiento con Nitazoxanida ya que en  la infección con  1000 LI no presentó efecto alguno y en la infección con 500 LI presentó solo un 20% de efectividad que es inconveniente para el tratamiento de esta parasitosis en ratas.

Con este estudio concluimos que el medicamento que presento mayor eficacia  ante la infección con 500 LI en ratas fue el Albendazol y en la Infección con 1000 LI fue la Ivermectina y el medicamento que en ambos casos presentó  escasa actividad fue la Nitazoxanida.

Cuadro No. 1 .- RESUMEN METODOLÒGICO USADO EN EL MODELO EXPERIMENTAL EN RATAS WISTAR

 Cuadro No. 2 –PROMEDIOS DE LOS RESULTADOS DE LAS DIFERENTES TÉCNICAS DE DIAGNOSTICO.

Tx = tratamiento, (-) = negativo, (+) = positivo.

Grafica No. 1.-   Nos muestra la sensibilidad, el técnica 1 (conteo de larvas en músculo) no es sensible a la carga parasitaria mientras que la técnica 2 (conteo en digestión artificial) muestra una respuesta estadisticamente significativa entre los 2 niveles de infección ( 500 LI y 1000LI).

Grafica No. 2.- muestra que la técnica  conteo de larvas en corte es independiente del tipo de tratamiento, es decir no es sensible a la lectura, se observó ligeramente superior a la del control. La técnica de conteo de larvas en Digestión Artificial si es sensible a los tratamientos y miestra un control de lectura alto a los tratamientos.

Grafican No. 3.- En este histograma, donde solo se observan las larvas en Digestión artificial, llama la atención como los tratamientos 1 ( control con 1000 LI) y 7 (infección con 1000 LI y tratadas con Nitazoxanida) muestran similitud en la respuesta, y resalta  el  tratamiento 4  (infectados con 500 LI y tratados con Albendazol)es el que presenta menor número de larvas infectantes, seguido por el tratamiento  6 (infectados con 1000 LI y tratados con Ivermectina).

Grafica No. 4.-  Aquí se presenta  el intervalo de confianza de los resultados y se observa como  3, 4, y 5 son los que presentan mas corto y mejor intervalo.

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