 120. Obtención de muestras para el diagnóstico de
parasitosis gastrointestinal de bovinos y ovinos.
Carlos Entrocasso
centrocasso@balcarce.inta.gov.ar
Grupo de Sanidad Animal
Estación Experimental Agropecuaria Balcarce
Estimación e
interpretación del HPG (número de huevos por gramo de materia
fecal)
Anamnesis y
consideraciones generales
En general no hay una
relación directa entre el HPG y el Nº de parásitos existentes en
el tracto gastrointestinal.
Edad
En el bovino después de
los 9 –11meses de edad es muy relativo el dato de HPG, sobre todo
si es bajo porque indica que la inmunidad puede estar actuando en
forma importante, pero si el HPG es alto se interpreta el conteo y
su importancia como tal.
Estado general
Es conveniente recorrer
los potreros para observar el o los lotes de animales problemas,
de esta manera se tiene una mejor visión del conjunto y se puede
considerar comparativamente al lote en su conjunto.
Es de interés especial
considerar:
-
Antecedentes de la
alimentación, cómo fue durante el año y sobre todo los 2 a 3 meses
antes hasta la fecha, en cuanto a calidad y cantidad del alimento.
-
Antecedentes de
enfermedades tanto infecciosas, carenciales o parasitarias.
Manejo del rodeo
Epoca de parición, de
destete, fecha de vacunación y de desparasitación. Es muy
importante conocer la marca del producto aplicado la última vez
(según el tipo de droga cambia la persistencia del efecto), a qué
tipo de potrero se los envió luego del tratamiento (por ej. los
potreros bajos son más peligrosos que los altos).
Condiciones climáticas
que pudieran haber producido alteración en la supervivencia de las
larvas en la pastura. Recordar que la humedad favorece la
supervivencia de las mismas y son factores adversos el sol intenso
y la sequedad.
Tipo de pasturas
Aquellas en las que
abundan el trébol y otras leguminosas mantienen mejor la humedad
del suelo y favorecen por lo tanto la sobrevivencia y evolución de
las larvas. Si su número es muy alto será un peligro constante
para la reinfección de los animales. El historial de problemas
previos por potrero es un dato valioso.
A estos aspectos
debemos considerarlos en su conjunto ya que todos se
interrelacionan y ayudan a realizar un diagnóstico y pronóstico.
Extracción de muestras
1.
Número de
animales: debe ser representativo del lote afectado, tener en
cuenta que todos esos animales estén en un mismo potrero, porque
si pertenecen a potreros distintos se debe tomar de los dos lotes
muestras independientes. En general se considera adecuado un
número de 12 a 15 muestras por lote. La capacidad de análisis del
laboratorio es una limitante que debe tenerse en cuenta al
organizar un muestreo en un establecimiento.
2. Las
muestras deben ser individuales, no realizar un pool mezclando
materia fecal de varios animales. Los análisis individuales
permiten apreciar si hay animales con HPG alto con respecto a
otros (se puede deber al principio de una infección) y más si
existen condiciones concomitantes, anteriormente citadas. El pool
haría que esos datos se diluyeran en el resto.
3.
Tener
cuidado con elegir sólo animales con diarrea, este signo
importante es un indicador del final de la enfermedad; los
animales diarreicos quizás no representen -por su bajo conteo de
HPG- la realidad. Si se mandan apartar animales a caballo, tener
en cuenta que los enfermos, correrán menos llegando sólo los
mejores.
4.
Se deben
sacar las muestras directamente del recto estimulando el reflejo
anal introduciendo los dedos. Esto permite tomar información
adicional, como consistencia, color, presencia de mucosidad, etc.
Es práctico llenar la manga con animales e ir sacando las muestras
sin soltarlos porque así se inmovilizan entre ellos.
5.
La
cantidad de materia fecal debe ser entre 80-100 gramos por animal.
La cantidad de huevos no está distribuida homogéneamente en la
materia fecal, de esta manera luego de obtenida la muestra en el
laboratorio se homogeiniza y se toma la cantidad necesaria para el
método. Este punto es sumamente importante y ocasiona grandes
errores si no se toma esos recaudos.
Información
complementaria útil
La necropsia a campo y
el procesamiento en el laboratorio de las muestras de animales
parasitados brindará información precisa no sólo del tipo y número
de parásitos presentes sino también del estado de desarrollo de la
población parasitaria.
Cuando se tiene
oportunidad de sacrificar un animal o realizar la necropsia de uno
recién muerto, es conveniente medir el pH del contenido abomasal
con la finalidad de estimar la funcionalidad de dicho órgano (pH
normal = 1,5 - 2; animales muy parasitados pH 4-6).
La necropsia puede
revelar alteraciones morfológicas asociadas a la parasitosis como
por ejemplo: edemas en tejido subcutáneo, ascitis, linfonódulos
mesentéricos hipertrofiados y edematosos, gastritis con edema de
pliegues, enteritis catarral, etc.
Necropsia y toma de
muestras para recuento de parásitos adultos
Una vez abierta la
cavidad abdominal se procede a ligar el cuajo a la altura del
píloro, y se lo separa del resto del aparato digestivo junto al
librillo para evitar derrames de contenido. El otro corte se hace
inmediatamente detrás de la ligadura en el píloro.
El intestino delgado es
separado del mesenterio con cuchillo filoso hasta llegar a la
válvula ileocecal.
El intestino grueso se
separa de la misma manera, descartándose la última parte del
recto.
Equipamiento necesario
2 Baldes de 12-15 lts.
(A) y 5-7 lts. (B)
2 Cucharones de 100 cc.
(C) y 25 cc. (D)
1 Recipiente de vidrio
de 750 cc. de capacidad, boca ancha y tapa metálica roscada
1 Abridor de intestino
(tijera punta roma)
Bandejas
Placas de Petri
Solución yodo-iodurada;
hiposulfito de sodio.
Preparación del equipo
El balde B es marcado
en su lateral con divisiones en múltiplos de 10 (10, 20, 30, ...)
equivalentes al volúmen del cucharón C.
El recipiente de vidrio
de 750 cc. es marcado en su lateral con divisiones en múltiplos de
5 (5, 10, 15, ...) equivalentes al volúmen del cucharón D. A la
tapa metálica se le corta en círculo la parte superior para
colocarle una malla de 60 meshes la cual quedará fija a través de
una arandela plana de goma, cuando la tapa se enrosque en el
frasco.
Procedimiento de
laboratorio
Una vez obtenido el
cuajo y el intestino delgado, se separa una de otra evitando se
pierda el contenido. Al cuajo se lo abre por una de sus curvaturas
y el contenido es volcado en el balde A. Se lava cuidadosamente
por pliegue agregando el lavado al contenido ya guardado.
El contenido del balde
A es pasado al balde B y se agrega agua hasta nivelar en una de
las marcas laterales.
Homogeneizar el
contenido con el cucharón C y extraer varias alícuotas hasta
completar el 10 % del total del lavado.
La submuestra del 10%
se pasa al recipiente de vidrio marcado el cual se cierra y se
agita vigorosamente para disminuir el contenido. Se agrega agua y
se repite la operación hasta que el contenido quede límpido.
Agregar agua hasta
nivelar el contenido en una de las marcas laterales. Se
homegeiniza con el cucharón D y se extrae una alícuota equivalente
al 10% como en el punto 3.
La alícuota se pone en
una placa de Petri con el agregado de unas gotas de tintura de
yodo. Se deja reposar 3 minutos y se decolora con hiposulfito de
sodio. En un fondo claro se observarán los nematodes teñidos
marrón oscuro. Para facilitar la tarea se efectuará la lectura
sobre una superficie iluminada.
Se extraerán los
parásitos con aguja histológica o símil y se los pasa a una placa
de Petri con agua para su recuento e identificación.
Factor de
multiplicación: Según las diluciones seguidas en el ejemplo cada
parásito obtenido debe ser multiplicado por 100. Esto surge porque
las dos alícuotas con las que se trabajó fueron del 10% cada una.
Por lo tanto multiplicado los dos porcentajes arrojan el factor de
multiplicación.
Guía de recuento de
adultos en bovinos (varía con la edad).
(Skerman y Hillard, 1966)
|
Géneros |
Grado de
infección |
|
Bajo |
Moderado |
Alto |
|
Haemonchus |
1-400 |
400-1000 |
>1000 |
|
Ostertagia |
1-5000 |
5000-10000 |
>10000 |
|
Trichostrongylus
axei |
1-10000 |
10000-30000 |
>30000 |
|
Cooperia |
1-5000 |
5000-10000 |
>12000 |
|
Bunostomun |
1-50 |
50-200 |
>200 |
|
Oesophagostomun
Radiatum |
1-100 |
100-1000 |
>1000 |
Guía de recuento de
adultos en ovinos
|
Géneros |
Grado de
infección
|
|
Bajo |
Moderado |
Alto |
|
Haemonchus |
1-500 |
500-1500 |
>1500 |
|
Ostertagia |
1-1000 |
1000-10000 |
>10000 |
|
Trichostrongylus |
1-1000 |
1000-10000 |
>10000 |
|
Bunostomun |
20 |
50 |
>100 |
|
Nematodirus |
1-3000 |
3000-10000 |
>10000 |
|
Cooperia |
1-10000 |
10000-20000 |
>20000 |
|
Oesophagostomun |
1-50 |
50-100 |
>100 |
|
Chabertia |
1-20 |
20-100 |
>100 |
Fuente: Circulo de Médicos
Veterinarios del Sur de Santa Fe
http://www.veterinariosursf.com.ar
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