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140. Inmunodiagnóstico de enfermedades infecciosas en bovino. TIPO DE ESTUDIOS SEROLÓGICOS.

Estudios poblacionales. Screening. Titulación. Estudios retrospectivos. Diagnóstico diferencial. Titular los anticuerpos vacunales para determinar la protección de la vacuna o de la pauta vacunal. Hacer estudios de prevalencia Testar la presencia de antígenos (virus).

Estudios poblacionales. Screening. Este examen individual estudia la circulación de agentes infecciosos y detecta únicamente positivos y negativos. Si un animal ha tenido contacto con la enfermedad o ha sido vacunado, normalmente será positivo. Si estudiamos al 100% de la población estamos haciendo un screening, lo cual es fundamental en un programa de control o erradicación. Si simplemente queremos conocer los problemas sanitarios de la explotación haremos un monitoreo sobre un porcentaje de los animales frente a los agentes infecciosos (virus) buscados. Estos estudios sólo exigen una determinación a dilución única. Son económicos pero sólamente podemos decir suero positivo o negativo, en ningún caso podemos extrapolar datos de titulación. Un monitoreo correcto hay que hacerlo sobre un 20% de los animales objetivo de la explotación y debes centrarlo sobre el objetivo que quieres tener bajo control. seropositivos, dudosos, madres, destete, etc.  

Tabla 1. Monitoreo sobre 10 animales de una explotación Vaca

BVD IBR PI3 BDSV
0151 + - - -
0163 + + - -
0725 + - - -
0324 + - - -
0298 + + - -
0345 + - - -
0367 + - - -
0189 + - - -
0246 + - - -
0532 + - - -

Como ves todos los animales son seropositivos a BVD (probablemente vacunados), mientras que sólamente dos lo son a IBR (son de enfermedad, ver más abajo).

Titulación. En una segunda fase se pueden titular los anticuerpos y dar interpretación diagnóstica al proceso (sólo a los seropositivos, los que han salido positivos al screening). Los picos de titulos altos (ver figura 1.) normalmente corresponden a enfermedad. Este estudio exige hacer 7-8 diluciones de cada suero y ensayarlas individualmente, por lo que el estudio es 7-8 veces más caro. Sin embargo, es la única forma de estudiar de un modo fiable el título y por lo tanto la evolución de la enfermedad o la protección de la vacuna.

Estudios retrospectivos. En su caso, podemos hacer un diagnóstico retrospectivo (estudio de los títulos de un par de sueros de varios animales tomados en un intervalo de dos ó tres semanas entre si) para averiguar la evolución del título de anticuerpos en el tiempo. Es fundamental hacer la titulación de todos los sueros el mismo día (también son necesarias 7-8 diluciones).

Los resultados de este estudio van a depender de la elección de los animales a sangrar y el agente infeccioso a estudiar(ver figura 2). Ejemplos: a) Si los animales son terneros de más de 30 días y sin vacunar o vacunados hace tiempo, la evolución de títulos de Atc debería ser plana. ; b) Si los animales son terneros de pocos días la retrospectiva nos debería dar una disminución del título de Ac; c) Si fueran animales adultos, sin vacunar o vacunados hace tiempo y sin sintomas clínicos de la enfermedad, lo títulos deberían mantenerse o bajar.

Los casos contrarios (aumento de títulos de anticuerpos) y si no hubiera por medio ninguna vacunación, son sospechosos de nuevas infecciones. Hay que notar que el estudio de sueros pareados de vacas que hayan abortado los clínicamente sospechosos no nos van a dar ninguna información, dado que han podido seroconvertir en el momento de la primera toma de sangre.

Diagnóstico diferencial. Sólo es posible hacerlo con vacunas marcadas (IBR, Aujeszky) o con vacunas inactivadas (BVD). Esto es muy importante. Por ejemplo en el caso del BVD no puedes hacer un programa de erradicación si has vacunado con vacuna viva, porque no podemos distinguir los anticuerpos vacunales de los de infección.

Este estudio permite con una sola dilución testar la presencia de anticuerpos vacunales. En el caso de que se quiera estudiar la presencia de anticuerpos vacunales y de infección es preciso utilizar dos kit diferentes.

Titular los anticuerpos vacunales para determinar la protección de la vacuna o de la pauta vacunal. Con un screening de un grupo representativo de animales que hayan sido vacunados, se sangran dos o tres veces con un intervalo de 20 días. Con estos resultados podemos decir si han respondido bien a la vacunación y además podemos determinar la titulación de anticuerpos vacunales para poder distinguir en un futuro de anticuerpos infecciosos.

Hacer estudios de prevalencia (animales infectados en el rebaño en un momento concreto) y de incidencia (nuevos casos aparecidos desde el ensayo anterior).

Testar la presencia de antígenos (virus). Este método consiste en el aislamiento del virus directamente de una muestra orgánica del animal. Tiene mucha utilidad en animales con síntomas clínicos o muerto, dado que un estudio serológico en estos animales no nos va a dar mucha información. Sería interesante para la detección de animales inmunotolerantes dado que están excretando el virus constantemente.

Como puedes observar es muy importante que a la hora de enviar muestras de sangre identifiques muy bien de que animales se trata y con que y cuando se han vacunado. Un suero sin esta información es incompleto.

Ejemplo. Modo de trabajo en una explotación.

Supongamos una explotación de 100 animales interesada en trabajar frente a BVD e IBR. La explotación se vacuna con vacuna viva frente a BVD e IBR.

BVD.

En el caso del BVD la mayoría de los animales serán seropositivos y no existe posibilidad ninguna de distinguir entre anticuerpos vacunales y de infección con una sola dilución. Sin embargo sí puedes titular (ver fig 1), los titulos altos de algunos animales normalmente corresponden a enfermedad. También sabremos que umbral de Ac tenemos en la explotación después de vacunar.

En cualquier caso si quieres hacer un programa de erradicación te aconsejamos que comienzes a utilizar vacunas inactivadas.

Si sospechamos que en la explotación hay animales inmunotolerantes habría que recoger muestras orgánicas (leche, semen o exudados nasales) en animales que dan seronegatividad o títulos bajos de Ac. Si dan positivo, sacrificarlos.

IBR.

  • Si tras monitorear (diagnóstico diferencial al utilizar vacunas marcadas) un porcentaje de la explotación (20%) encontramos una baja prevalencia (a tu criterio),en el caso de que decidas eliminar IBR de la explotación es necesario hacer un screening sobre todo el efectivo y eliminar o al menos separar a los seropositivos.

  • La continuación del trabajo exige monitorear la explotación periódicamente para determinar la prevalencia y la incidencia del siguiente modo.

Enero del 97: 50 animales seropositivos. La prevalencia es de 50 animales y la incidencia es de 50 animales (casos nuevos)

Junio del 97: 75 animales seropositivos. La prevalencia es de 75 animales la incidencia es de 25 animales. Algo esta funcionando mal porque la prevalencia aumenta.

Diciembre del 97: 45 animales seropositivos. La prevalencia es de 45 animales la incidencia es de 0 animales. No se están produciendo nuevos casos y estamos eliminando progresivamente el agente.

Tabla 2. Posibilidad diagnóstica frente a BVD e IBR.

  BVD IBR IBR IBR BVD BVD*
  Sin Vacunar Sin Vacunar Inactivada Viva Inactivad Viva
      Marcada Marcada no Marcada  
Screening x x x x x  

Titulación enfermedad

x x x x x  
Retrospectivo x x x x x x
Diferencial     x x x  

Titulación protección

    x x x x

Prevalencia  incidencia

x x x x x  

Deteccion virus

x x x ? x ?

 * La vacuna viva de BVD no permite distinguir anticuerpos vacunales de infección

Es difícil distinguir los virus vacunales y salvajes.

Te adjuntamos una tabla con algunos de los procesos infecciosos más importantes y con las pruebas diagnósticas que podemos realizar.  

  Screening* Diferencial** IPX***
Problemas respiratorios:      
IBR x x x
BVD x x x
Clamydia psitassi     x
Parainfluenza 3 x   x
V Sincitial respiratorio x   x
Tuberculosis Gamma-Interferon    
       
Problemas digestivos:      
Paratuberculosis Gamma-Interferon   x
Rotavirus x   x
Coronavirus x   x
Clamydia psitassi     x
       
Problemas reproductivos:      
IBR x x x
BVD x x x
Clamydia psitassi     x
Leptospira x   x
Neospora caninum x   x
Toxoplasma     x
Candida albicans     x
Campylopbacter fetus     x
Listeria monocytogenes     x

* Screening: Contempla screening, titulación y retrospectivo.

** Diferencial: Solo se puede realizar sobre sueros de animales vacunados con vacunas marcadas.

*** IPX: Inmunoperoxidasa de muestras biológicas (leche, exudado nasal, semen, contenido intestinal, fetos, placenta,c otiledones, etc.) para buscar el antígeno en cuestión.

 Fuente: www.exopol.com

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