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Exopol
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A un laboratorio de diagnóstico
llegan muchos tipos de muestras: animales vivos, fetos y sus envolturas,
órganos, sueros, hisopos (uterinos, nasales, rectales, etc.), raspados cutáneos,
semen. En cada una de ellas se pueden analizar muchas enfermedades, aunque
cualquier muestra no es válida para todas las analíticas.
Por esta razón, y antes de enviar la
muestra, el veterinario o el técnico de la explotación deben confirmar con el
laboratorio que muestras tienen que remitir para localizar cada patógeno.
Recepción de la muestra.
Un laboratorio recibe al día muchos
envíos diferentes y en cada uno de ellos varios tipos de muestras que se
procesan en distintas zonas del laboratorio y por diferente personal. Así, en un
caso de abortos en la granja podemos recibir hisopos tomados en útero, varios
fetos o varias hembras, y es fundamental que todas las muestras recibidas se
identifiquen bien en la recepción (nombre del ganadero, nombre del veterinario)
y quede muy claro que hay que hacer en cada una de ellas.
Al dar entrada a las recepciones, un
veterinario especialista lee el informe que envía el técnico adjunto al paquete
y crea una ficha en el ordenador, en la que se indica lo que hay que estudiar en
cada una de las muestras recibidas. En algunas ocasiones tras leer el informe, o
a la vista de las lesiones que observamos en la sala de necropsias, podemos
incluir algún patógeno que no había sido solicitado previamente.
Para que el estudio de las muestras
sea válido, es fundamental que éstas se reciban en buenas condiciones.
Idealmente deben proceder de animales que no han recibido tratamiento
antibiótico en los últimos 5 dias.
Distribución de las muestras
Los laboratorios se dividen en
varias secciones que realizan actividades diferentes, por ejemplo: Necropsias,
Sala de limpieza, Microbiología, Inmunoperoxidasa (IPX; Inmunocitoquímica),
Serología, etc. Algunas muestras van a una sola de las secciones, es el caso de
los sueros que sólo se usan en los análisis serológicos, sin embargo otras se
procesan en más de una sección. Así, sobre un animal se hace una necropsia y se
toman muestras para microbiología e inmunoperoxidasa y también para búsqueda de
parásito.
En cualquier caso el circuito de las
muestras siempre tiene la misma dirección, de sucio a limpio. De este modo al
laboratorio "limpio" sólo entran pequeñas muestras de tejido (IPX), sueros y
placas en las que se han sembrado los tejidos para el aislamiento de las
bacterias.
¿Que se hace en cada sección?
Necropsias: Para mantener la
limpieza en el resto de las instalaciones las muestras entran al laboratorio
únicamente por aquí. En esta sala se hace la recepción de los envíos, la
disección de los cadáveres y los órganos y tras estudiar las lesiones
observadas, se reparten las muestras a las diferentes secciones del laboratorio.
Todas las necropsias las hacen
veterinarios especializados que en función de los análisis solicitados y las
lesiones observadas toman pequeñas muestras representativas de los órganos
afectados para su estudio microbiológico y para los estudios inmunocitológicos
de virus, parásitos y algunas bacterias, además de preparar las tinciones y
realizar los análisis coprológicos.
En el momento de la necropsia se
lleva a cabo también la siembra de bacterias. Para ello se corta un fragmento
del órgano afectado y se presiona sobre la superficie de placas de crecimiento.
De este modo, las bacterias que están infectando al órgano quedan en la placa
donde crecerán y podrán ser identificadas.
De la sala de necropsias salen las
muestras hacia el laboratorio, y los órganos y el material sobrante se
introducen en recipientes de seguridad biológica para su eliminación en una
planta especializada en el tratamiento de este material.
Las muestras entran a la sala de
necropsias directamente del exterior. En esta sala se hace la recepción de las
muestras, la necropsia de los animales, la siembra para estudios bacteriológicos
y la toma de muestras para estudios inmunocitológicos (IPX). Todos los restos
biológicos son eliminados en envases especiales.
Sala de esterilización y
preparación de medios: Se emplea para esterilizar todo lo que sale del
laboratorio (placas de crecimiento de bacterias, hisopos, muestras de órganos,
etc.), para esterilizar y lavar el material usado y para preparar algunos
medios. Esta habitación también supone un paso intermedio entre la zona sucia
que es la sala de necropsias y las zonas limpias del laboratorio.
Microbiología-Inmunoperoxidasa
En este espacio se trabaja con
material potencialmente peligroso, por lo que la sala reúne las características
de seguridad necesarias para proteger a las personas que manipulan las muestras
y también a estas de posibles contaminaciones. El trabajo se realiza dentro de
cabinas de seguridad biológica que protegen la muestra y a quien la manipula
Aquí están ubicadas las estufas en
las que se incuban las placas que se han sembrado en la necropsia (37ºC durante
al menos 24 horas); aquí también se realizan las pruebas bioquímicas para
identificar las bacterias que han crecido.
Una vez que una bacteria se ha
individualizado se hace un antibiograma para ver a que antibióticos pueden
usarse en el tratamiento. Para ello la bacteria se siembra en una placa de
crecimiento en la que se añaden unos discos de papel impregnados con los
distintos antibióticos. El antibiótico difunde al medio de crecimiento alrededor
del disco. Si la bacteria es sensible, no habrá crecimiento junto al disco (halo
transparente) si es resistente crecerá junto al disco (ausencia de halo).
Las bacterias que tienen interés y
han sido aisladas se conservan congeladas para, en su caso, elaborar autovacunas
(sólo laboratorios autorizados).
En la sala de Microbiología se
incuban las bacterias sembradas a partir de los tejidos, se identifican mediante
pruebas, se realizan antibiogramas y se congelan para una posterior elaboración
de autovacunas.
En la sección dedicada a los estudio
inmunocitoquímicos, se procesan los tejidos en varias fases laboriosas y
delicadas. El trabajo se realiza dentro de cabinas de seguridad biológica que
protegen la muestra y a quien la manipula. En este proceso, se logran aislar
células y patógenos de la muestra
En la sala de inmunocitoquímica, a
partir del tejido inicial y tras numerosos pasos, se obtienen células
individualizadas que se depositan en portaobjetos para su marcación.
Serología
Unos días después de enfermar el
animal produce anticuerpos frente al patógeno que lo infectó. En los sueros
recibidos en un laboratorio podemos estudiar la presencia de estos anticuerpos e
incluso decir cuantos hay (titulación).
Los animales vacunados también
producen anticuerpos, por esta razón es necesario adjuntar con los sueros la
información sobre las vacunaciones realizadas para poder escoger la técnica
serológica más adecuada e interpretar los resultados adecuadamente.
La serología es muy empleada en
otras especies animales pero actualmente tiene pocas aplicaciones en
cunicultura.
Lectura
Los resultados de inmunocitoquímica
se valoran en el microscopio por personal especialmente entrenado y a ciegas.
Esto último quiere decir que la persona que lee estas preparaciones desconoce
las características del caso para evitar que pueda estar influenciada en la
interpretación de los resultados.
En todos los casos en el microscopio
se contrasta la muestra problema con un control, llamado negativo, que consiste
en la misma muestra pero sin marcar. Además el laboratorio regularmente
comprueba que los procedimientos y reactivos que emplea son los adecuados para
todos y cada uno de los patógenos estudiados. Esto se hace utilizando tejidos
control, por ejemplo se utilizan células infectadas con el virus de la
Mixomatosis y las mismas células sin infectar como controles de calidad.
Otras instalaciones
Anejo al laboratorio están los
servicios y el vestuario por el que las personas entran al laboratorio
exclusivamente por una zona diferente a la utilizada para la recepción de las
muestras.
Oficina
Al final de todo el proceso la
oficina recibe los resultados de las diferentes secciones y los reúne en un
único informe. En realidad, la mayoría de los resultados obtenidos se han
apuntado directamente en el ordenador y la oficina dispone de ellos en todo
momento. Evitar el tránsito de papeles y el no tener que introducir los mismos
resultados varias veces evita la aparición de errores.
Contacto personal
El resultado laboratorial siempre da
alguna información, incluso cuando el resultado del mismo es negativo. La labor
del personal de la oficina es asegurarse de que el cliente recibe un resultado y
una interpretación del mismo. Esto es una vía de doble entrada, porque tanto el
cliente como el laboratorio aprenden.
De hecho, la información obtenida al
comentar el caso con el técnico de la explotación vuelve y se difunde entre todo
el personal del laboratorio, con el objetivo de mejorar su trabajo. En todos los
casos, al responsable de cada explotación se le envía el informe por correo
electrónico, postal y/o fax. Además se le avisa en su teléfono móvil en el
momento en que el resultado está disponible.
Investigación y Desarrollo
Poner a punto nuevas técnicas e
incluso descubrir nuevos patógenos también es una parte importante del trabajo
de un laboratorio en crecimiento. Concretamente nosotros estamos adaptando la
Citometría de flujo, ampliamente utilizada en humana, al diagnóstico en
veterinaria. Además estamos haciendo especiales esfuerzos en el estudio de los
Mycoplasmas que son responsables de neumonías en todas las especies ganaderas
(Villa y cols. Veterinary Record 148, 788-789; Gracia y cols. Veterinary Record;
en prensa) y hemos desarrollado nuevos métodos en el diagnóstico de las
Brachispiras que son el agente causante de la disentería porcina. |
